專用血清能為細胞提供必要的營養和生長因子,促進細胞生長和增殖,常被用于細胞培養、免疫學實驗、生物化學實驗以及藥理學和毒理學實驗等。在儲存時,通常需要將其置于-15℃至-20℃的環境中,以保持其活性和穩定性。
專用血清在使用過程中可能會遇到問題,這些問題可能會影響實驗結果的準確性和重復性。以下是幾種常見的問題及其相應的解決方法。

1、沉淀現象
問題描述:
在儲存或使用過程中,有時會發現血清中出現不溶性的沉淀物。這通常不會影響質量,但可能會引起擔憂。
解決方法:
適當處理:輕微的沉淀可以通過緩慢解凍后輕輕搖晃來分散。如果沉淀較多,可以將血清加熱至56°C并持續30分鐘進行滅活處理,之后再通過過濾去除沉淀。
避免反復凍融:盡量減少血清的反復凍融次數,因為每次凍融都會增加沉淀形成的可能性。
2、細胞生長不良
問題描述:
即使添加了適量的血清,細胞仍然表現出生長遲緩或形態異常的現象。
解決方法:
檢查血清質量:確認所使用的血清是否符合預期的質量標準,特別是內毒素水平、總蛋白含量等關鍵指標。
優化培養條件:根據具體的細胞類型調整血清濃度,有時需要嘗試不同的比例以找到適合的條件。此外,確保培養環境(如溫度、pH值)處于良好狀態也很重要。
3、內毒素污染
問題描述:
高水平的內毒素會導致細胞毒性,抑制細胞增殖甚至導致細胞死亡。
解決方法:
選擇低內毒素血清:在購買時優先選擇經過嚴格檢測且標明低內毒素水平的產品。
額外處理:如果懷疑存在內毒素污染,可以考慮采用超濾或其他物理化學方法進一步降低內毒素含量。
4、pH值不穩定
問題描述:
某些情況下,它可能導致培養基pH值波動,影響細胞健康。
解決方法:
緩沖系統調整:使用適當的緩沖體系(如HEPES)可以幫助穩定pH值。
定期監測:定期檢查培養基的pH值,并根據需要調整CO2濃度或更換新鮮培養基。
5、微生物污染
問題描述:
盡管大多數商業化的產品都經過嚴格的無菌處理,但仍有可能發生微生物污染的情況。
解決方法:
加強無菌操作:在處理血清及配制培養基時嚴格執行無菌技術,減少外界污染的風險。
二次過濾:對于特別敏感的實驗,可以在加入細胞前對含血清的培養基進行0.2微米過濾除菌。
專用血清通過了解這些常見問題及其解決方案,研究人員可以更好地應對在使用過程中遇到的各種挑戰,從而保證實驗順利進行并獲得可靠的實驗結果。